正确答案: ABDEF

每条引物长度通常为18~25个核苷酸 引物3'端的第1、2个碱基必须与模板严格配对 引物5'端可加修饰成分,如酶切位点、引入突变位点、生物素标记等 两引物有匹配的GC含量和相似的退火温度 引物序列通常位于基因组DNA的高度保守区

题目: PCR引物设计是实验成败的关键环节。

解析:引物设计的原则包括:①引物长度以18~25bp为宜,引物过长,模板结合不充分,导致扩增产物减少;引物过短(<15bp),导致非特异性扩增,降低产物的特异性。②引物序列通常位于基因组DNA的高度保守区。一对引物间不应存在互补序列,避免形成引物二聚体。③两引物有匹配的GC含量和相似的退火温度,否则会影响扩增的效率和特异性。通常G+C含量为45%~55%。④引物3'端的第1、2个碱基影响Taq DNA聚合酶的延伸效率,影响PCR的扩增效率和特异性,必须与模板严格配对;引物5'端可加修饰成分,如酶切位点、引入突变位点、启动子序列、生物素、荧光素和地高辛标记等,以便对产物进行分析和克隆等。

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举一反三的答案和解析:

  • [多选题]进行实验设计时,为了消除干扰因素以及便于比较应注意的原则是
  • 设立对照组

    确定足够的实验对象

    随机分组

    规定统一的评价指标

    对实验对象进行严格挑选


  • [多选题]葡萄糖耐量试验标本的标准采集方法是
  • 共采血5次,分别是空腹,口服葡萄糖后30分钟、1小时、2小时、3小时

    口服75g葡萄糖,混入250ml饮用水中,5分钟内喝完

    采血前一周每日主食不低于200g

    采血当天空腹,禁止剧烈运动


  • [多选题]等电聚焦电泳法在电极之间形成的pH梯度是
  • 稳定的

    连续的

    线性的


  • [多选题]进行TDM的临床意义在于
  • 保证用药有效性

    保证用药安全性


  • [多选题]实验室应选择预期用途经过确认的检验程序,首选程序可以是
  • 体外诊断医疗器械使用说明中规定的程序

    公认/权威教科书中的程序

    经同行审议过的文章或杂志发表的程序

    国际公认标准或指南中的程序

    国家地区法规中的程序


  • [多选题]酶是具有一定空间结构的蛋白质,只有一少部分基团与酶的催化作用直接相关,这就是必需基团。这些必需基团在空间位置上相对集中所形成的特定空间结构区域是酶发挥催化作用的关键部位,称为酶的活性中心。关于酶活性中心,叙述不正确的是
  • 是由一条多肽链中若干相邻的氨基酸残基以线状排列而成

    仅通过共价键与底物结合

  • 解析:酶活性中心与底物共价结合,将底物转化为产物。

  • 考试宝典
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