PCR引物设计的原则包括

【名词&注释】

基因组(genome)、核苷酸(nucleotide)、外显子(exon)、聚合酶(polymerase)、酶切位点(restriction site)、生物素标记(biotin labeled)

[多选题]PCR引物设计的原则包括

A. 引物长度以18～25个核苷酸为宜
B. 5'端的第一、二个碱基影响Taq DNA聚合酶的延伸效率，与模板应严格配对
C. 3'端可加修饰成分，如酶切位点^{(restriction site)}、生物素标记^{(biotin labeled)}等，便于产物分析和克隆等
D. 通常位于基因组DNA的高度保守区，最好跨越两个外显子
E. GC含量以45%～55%为宜

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举一反三：

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